Applicering av serumflaska
Serumflaskan är gjord av borosilikatglas med låg extraktion och den färglösa klara flaskan uppfyller kraven för USP Typ I och ASTM E 438 Type I Standard Class A. Den kan autoklaveras vid 121 grader i 20 minuter och kan delas upp i 125 ml , 250ml, 500ml, 1L, 2L beroende på volymen.
Serumflaska är en behållare för förvaring av serum, som vanligtvis är gjord av PET-material genom injektionssträckblåsningsprocess. Mediet är det näringsämne som krävs för celltillväxt. Enligt dess källa är det uppdelat i syntetiskt medium och naturligt medium, som båda kan förvaras i serumflaskor.
Serumflaska
Naturligt medium:
Det vanligaste naturliga mediet är serum, i princip kalvserum. Serum innehåller en mängd olika celltillväxtfaktorer, vidhäftningsfrämjande faktorer och deras multiaktiva substanser. I kombination med syntetiskt medium kan celler föröka sig och växa smidigt. Serum måste förvaras i speciella serumflaskor vid -5 grader till -20 grader.
Syntetiskt medium:
Syntetiskt medium är strikt formulerat enligt typen och mängden av ämnen som cellerna kräver. Det finns många typer och kända komponenter, vilket underlättar kontrollen av experimentella förhållanden. Innehåller kolhydrater, aminosyror, lipider, oorganiska salter, vitaminer, spårämnen och celltillväxtfaktorer. Men jämfört med det naturliga mediet kan vissa naturliga okända komponenter inte ersättas med kända kemiska komponenter. Därför måste det grundläggande syntetiska mediet som används i cellodling också tillsätta en viss mängd naturliga mediumkomponenter för att övervinna den syntetiska kulturen. Otillräcklig bas är den vanligaste metoden att lägga till kalvserum.
Serumflaskans form är fyrkantig, lätt att greppa, resistent mot de flesta syra- och alkalikorrosion, sprödhetstemperaturen är -70 grad och den har fortfarande en viss seghet vid -30 grad. Det är en bra förpackningsbehållare, oavsett om det är naturligt medium eller syntetisk kultur. kan förvaras i serumflaskor.
För isolering, odling och identifiering av humana endotelceller från navelsträngsblod och etablering av acellulära kärlställningar genom förbättrad frys-upptining-metod
Att utforska genomförbarheten och det kliniska värdet av endotelceller som isolerats och odlats från humant navelsträngsblod.
Metoder: Navelsträngsblodet från fostren som genomgick ett heltäckande kejsarsnitt på avdelningen för obstetrik och gynekologi, det första anslutna sjukhuset vid Bengbu Medical College samlades in, placerades i en serumflaska innehållande 50U/ml heparin under aseptiska förhållanden, lagrad i en 4 graders islåda och transporterad till celler I odlingsrummet erhölls mononukleära celler från navelsträngsblod genom densitetsgradientcentrifugering. De erhållna mononukleära cellerna delades upp i två delar och fetalt kalvserum M199-medium (FCS-M199) och autologt serum M199-medium (AS-M199) tillsattes. Och de såddes i odlingsskålar med och utan humant fibronektin (HFN) (markerade som: F(0), F(1), A(0), A(1)) respektive. In vitro-induktion, differentiering och expansion utfördes.
De morfologiska förändringarna av vidhäftande celler under hela induktions- och differentieringsprocessen observerades, och de identifierades från olika vinklar i kombination med relaterade tekniker såsom immunhistokemi, immunfluorescens och flödescytometri.
Resultat: Efter 12 dagars odling började mononukleära celler från navelsträngsblod att fästa. Efter 3d började spindelformen dyka upp och sedan ökade antalet vidhäftande celler gradvis och blev gradvis spindelformade. Vid odling i upp till en vecka bildades en typisk koloni med spindelceller runt och runda celler i mitten. När cellerna odlades i 14 dagar kopplades de sammankopplade cellklustren gradvis samman och bildade en nätverksliknande struktur. Samtidigt, med den kontinuerliga ökningen av odlingstiden, började även de långa spindelcellerna gradvis förkortas, och visade en typisk gatstensliknande förändring.
De vidhäftande cellerna odlades under en vecka och det observerades att antalet celler i mediet med humant fibronektin var signifikant högre än det utan humant fibronektin, och det fanns ingen signifikant förändring i antalet celler i de två olika medierna.
