Hur man använder en pipett i labbet - Den kompletta guiden

Från gymnasieskolor och universitet till toppmoderna forskningscentra, pipetter är en stapelvara i laboratorier runt om i världen. Dessa små men mycket funktionella instrument finns i en mängd olika storlekar, konstruktioner och kapaciteter, med olika pipetter beroende på applikation. Nedan tittar vi på bästa praxis-tekniker för hur man använder pipetter i labbet. Vi täcker också några viktiga pipettfakta, inklusive instrumentets historia, typerna av pipettmodeller och användningen av pipettlabinstrument.

pipett

Vad är en laboratoriepipett?

Laboratoriepipetter är specialiserade verktyg som gör det möjligt för forskare att leverera vätskor säkert och exakt. Vanligtvis används i biologi, kemi och medicinska laboratorier, det här kolvdrivna instrumentet liknar en spruta och finns i många olika utföranden, från enkla glaspipetter i ett stycke till sofistikerade elektroniska pipetter. Noggrannheten och precisionen hos olika konstruktioner varierar stort, och laboratorier väljer pipetter utifrån deras unika behov. Vissa pipetter styrs manuellt, medan andra använder automatiserade tekniker.

Hur fungerar laboratoriepipetter?

De flesta laboratoriepipetter använder ett luftvakuum över vätskehållarkammaren för att aspirera och släppa ut vätskor. Denna luftförskjutning är designad för användning med både manuella och elektriska pipetter och kan ses när spetsen förs in direkt under vätskans yta. Trycket på kolven släpps sedan och drar vätska in i spetsen. För att släppa ut vätskan appliceras tryck på kolven, vilket tvingar vätskan tillbaka ner i kammaren och ut ur spetsen.

Laboratoriepipetters historia

Även om pipettkonceptet har funnits i över ett sekel, patenterades den första mikropipetten inte förrän 1957. Den utvecklades av den tyske forskaren Dr. Heinrich Schnitger, grundare av den branschledande laboratorieinstrumenttillverkaren Eppendorf. Schnitger började tillverka kommersiell 1961 och mikropipetter blev snabbt populära i laboratorier runt om i världen.

Den amerikanske uppfinnaren Warren Gilson och biokemiprofessorn Henry Lardy är också krediterade för att utveckla justerbara mikropipetter. Justerbara mikropipetter finns i olika storlekar och volymkombinationer för ökad laboratorieflexibilitet.

Mikro och stora pipetter

Mikropipetter är designade med precision i åtanke, vilket gör det möjligt för forskare att noggrant extrahera, transportera och dispensera vätskor i mikroliterintervallet. Mikropipettvolymerna sträcker sig från 1 till 1000 mikroliter. Mikropipetter är designade för stora partier med volymer från 0,25–5 ml.

Laboratoriepipetttyper

Under decennierna har tillverkare utvecklat en mängd olika pipetter för speciella applikationer. Pipetter finns idag i otaliga utföranden, och precisionen och noggrannheten hos olika modeller varierar stort. Nedan har vi listat några av de vanligaste pipetterna i labbet.

enkelkanalspipett

Enkanalspipetter, även kända som pipetter med variabel volym av luftförskjutning, är mångsidiga och kan användas i en mängd olika applikationer. De flesta erbjuder ett brett volymintervall mellan 0 och 2500 mikroliter. Beroende på applikationen kan forskare välja att använda justerbara enkanalspipetter med fast volym.

Den lilla och kompakta karaktären hos enkanalspipetter gör att de är idealiska för användning i små käll- och destinationskärl, såsom koniska rör och clamshell-kärl. Enkanalspipetter är inte bara tillräckligt kompakta för små behållare, de fungerar också bra med brunnar och brunnsplattor.

Enkanalspipetter av hög kvalitet är inte bara effektiva utan också ergonomiska, designade för att göra användarupplevelsen så intuitiv och bekväm som möjligt. Detta hjälper till att minimera risken för upprepade belastningsskador och ökar noggrannheten och precisionen.

Även om de är kompakta och lätta att använda, kan enkanalspipetter endast användas för att överföra ett vätskeprov åt gången. Det betyder att det kan vara tråkigt och tidskrävande att använda dem när flera överföringar krävs.

flerkanalig pipett

Flerkanaliga pipetter är idealiska för mikroplattapplikationer och är idealiska för småskaliga applikationer och repetitiva uppgifter. De flesta har mellan 8 och 12 huvuden, vilket gör att forskare kan överföra flera vätskeprover med en enda enhet.

Produktivitet är en av de största fördelarna med flerkanalspipetter, och tekniken minskar avsevärt antalet individuella överföringar som krävs. De gynnas ofta av forskare som arbetar med polymeraskedjereaktion (PCR), enzymkopplade immunosorbentanalyser (ELISA) och cellkulturforskning.

Medan flerkanalspipetter minskar antalet individuella överföringar som krävs, orsakar de fortfarande handtrötthet. Av denna anledning har många flerkanalspipetter fjäderbelastade spetsar för att minska handtrycket, minimera risken för upprepad belastningsskada och förbättra pipettens funktionalitet i laboratoriet.

elektrisk pipett

Repetitiv belastningsskada är en av de vanligaste riskerna som laboratorieforskare stöter på. Elektroniska pipetter minimerar risken för skador genom en automatisk avluftningsprocess. Elektroniska pipetter med interna motorer ger samma noggrannhet och precision som manuella pipetter, men utan den fysiska belastningen. Elektroniska pipetter är särskilt användbara vid utmatning flera gånger, en process som innebär att reagenserna delas upp i olika doser.

Till exempel kommer forskare som överför PCR-masterblandningar till 96-brunnsplattor att ha stor nytta av att använda elektroniska pipetter. Att använda en manuell pipett kräver 96 separata överföringar, vilket skulle resultera i betydande ergonomisk stress. Däremot kan elektroniska pipetter minska överföringstiderna med 30 procent eller mer, beroende på spetsstorlek och volym överförd vätska. Förutom att spara tid, minimerar användningen av elektroniska pipetter också risken för handskador och trötthet.

Luftförträngningshastigheten och spridningen regleras med hjälp av en intern motor, som hjälper till att minska förorening av fatet och förhindrar att luftbubblor bildas. De kan förprogrammeras för att passa specifika laboratorieuppgifter, vilket ökar effektiviteten. Elektroniska pipetter erbjuder också justerbart spetsavstånd, vilket gör att forskare kan överföra flera prover samtidigt.

Flerkanalig elektronisk pipett

Flerkanaliga elektroniska pipetter kombinerar effektiviteten hos flera huvuden med de ergonomiska fördelarna med automatisering. Att använda båda teknikerna kan avsevärt förbättra effektiviteten vid fyllning av mikroplattor. I många fall kan tiden som krävs för att slutföra en uppgift reduceras till mindre än en minut.

Serologisk pipett

I vävnads- och cellodlingsapplikationer är serologiska pipetter vanligtvis gjorda av glas eller polystyren. I laboratorier där sterilisering är en prioritet använder forskare ofta engångspipetter gjorda av hållbar plast. Serologiska pipetter används också ofta för flytande doser över 1 ml.

Manuell stegpipett

Med ett dispenseringsintervall på upp till 5 ml är pipetten idealisk för grundläggande och repetitiva uppgifter. De drivs av den positiva förskjutningsprincipen och kan användas för att dispensera små prover i snabb följd utan att fylla på kammaren. Genom att förlita sig på principen om positiv förskjutning är manuella stegpipetter idealiska för svårhanterliga trögflytande och flyktiga vätskor.