Som ordspråket säger, om en arbetare vill göra ett bra jobb måste han först vässa sina verktyg. Valet av förbrukningsvaror är mycket viktigt för att få tillfredsställande PCR-experimentresultat. När vi analyserar PCR-resultat fokuserar vi ofta på analys av primers, enzymkoncentration, temperatur och tid, men bortser från att PCR-förbrukningsvaror också är en av de påverkande faktorerna. Det finns många typer av PCR-förbrukningsmaterial, hur väljer man rätt PCR-förbrukningsmaterial? Här är några frågor som hjälper dig att hitta ditt svar.
pcr förbrukningsvaror
1. Varför är PCR-förbrukningsmaterial vanligtvis gjorda av PP?
Oavsett om det är vanlig PCR eller realtidsfluorescenskvantitativ PCR (qPCR), kommer dess förbrukningsvaror vanligtvis att vara i direkt kontakt med reagenser eller prover, så högkvalitativa material och bra bearbetningstekniker krävs i produktionen och beredningsprocessen. Allmänna förbrukningsvaror är gjorda av polypropen (PP). Polypropen (PP) är ett biologiskt inert material, ytan är inte lätt att fästa på biomolekyler och har god kemisk resistens och temperaturtolerans.
2. Hur väljer man PCR-rör/plattor med olika volym?
Vanliga volymer för PCR-rör/plattor:
• Enkelt rör/{{0}}rör/12-rör: 0,5mL, 0,2mL, 0,1mL
• {{0}}brunnsplatta: 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}brunnsplatta: 0,02mL
Specifikationer för PCR-rör/plattor:
Välj lämplig produkt enligt de specifika experimentella kraven. Volymen av de flesta PCR-rör kan uppfylla kraven för PCR-reaktioner. Kapacitetsspecifikationerna finns i standardkapacitet och låg kapacitet. Generellt rekommenderas att först välja lågkapacitetsrör. Eftersom reaktorrören/plattorna med låg volym har mindre takhöjd förbättras värmeöverföringen och förångningen minskar. Samtidigt är det nödvändigt att undvika att tillsätta för mycket eller för lite prov vid tillsättning av prover. För mycket kan leda till minskad värmeledningsförmåga, spill och korskontaminering, medan för lite kan orsaka förlust av provavdunstning.
3. Vad är skillnaden mellan det platta höljet/konvexa höljet på ett rör eller 8-radrör?
När provvolymen är liten, är enkelrör eller {{0}}rör att föredra. Men när reaktionsvolymbehovet är stort, råder enstaka rör, och volymen kan nå 0,5 ml. Det finns två typer av enkelrör och 8-rör med platt lock och konvext lock, var och en har sina egna fördelar. Platt lock ger exakt fluorescerande signalleverans för qPCR; lätt att skriva på markörer. Det konvexa locket är i kontakt med PCR-instrumentets lock för att minska rördeformation orsakad av tryck; Det kommer dock att påverka överföringen av fluorescerande signaler och kan inte tillämpas på qPCR-experiment.
4. Vilka är skillnaderna i användningsscenarierna för olika 96-brunnsplattor?
96-brunnsplattor är i allmänhet indelade i plattor utan kjolar, halvkjolar och heltäckande plattor.
Kjolfria plattor: Kompatibel med de flesta termocykler eller qPCR-maskiner, men inte lämpliga för automatiserade applikationer. Stabiliteten är inte hög under pipetteringsprocessen, och den måste användas med en tallrikhållare.
Halvkjolplatta: Den kan anpassas för att märka eller applicera streckkod, och automatisk applicering, och har god pipetteringsstabilitet.
Full kjolplatta: mycket lämplig för automatiserade laboratorieapplikationer, men även lämplig för etiketter och streckkodstillämpningar. God mekanisk hållfasthet, lämplig för PCR-maskiner med utskjutande moduler och hög stabilitet vid pipettering.
5. Är PCR-plattan/rörmaterialet tjockare och stabilare?
Nej. PCR-förbrukningsvaror måste ha en enhetlig väggtjocklek för att ge konsekvent värmeöverföring. Den ultratunna rörväggen är 50 procent tunnare än standardversionen, vilket ytterligare kan minska den termiska barriären, vilket resulterar i snabbare och bättre respons.
6. För 96-brunns- eller 384-brunnsplattor, varför är de avskurna hörnen och etiketterna inte samma?
Hörnskärning: Valet av hörnskärningsposition för PCR-plattan beror på det anpassade instrumentets krav för enkel positionering.
Identifiering: Alfanumeriska markeringar på PCR-plattor hjälper till att identifiera enskilda brunnar och provplatser. I allmänhet är det en logotyp med förhöjt färgnummer eller en graverad logotyp. För vissa automatiserade appliceringsexperiment kommer reaktionsplattan med tryckta märken att vara bättre förseglad.
7. Vissa brunnar på PCR-plattorna sticker ut medan andra är platta. Vilken är bättre?
Det som passar är bra. Vanliga PCR-plattor har två typer: platta brunnskanter och upphöjda brunnskanter. Reaktionsplatta med platt brunnskant, lämplig för de flesta termocyklister. Reaktionsplattan på kanten av stigarhålet är bekväm för tätning, vilket kan minska risken för korskontaminering mellan proverna.
8. Hur väljer man PCR-rör/plattor i olika färger?
För vanliga PCR-reaktioner kan transparenta användas. I realtids-PCR-reaktionen är det vita rörets känslighet och konsistens relativt sett högre. De vita rörväggarna förhindrar fluorescens från att passera genom rörväggarna och brytning, och förhindrar därigenom fluorescensen från att passera till värmemodulen, absorberas av modulen eller reflekteras inkonsekvent. Jämfört med genomskinliga rör kan starkare och mer fokuserade fluorescenssignaler samlas upp på toppen av vita rör.
