Vad är innebörden av PCR-nukleinsyradetektion, metoder och steg
Nukleinsyratestning är för närvarande ett effektivt sätt att avgöra om viruset bär på det nya coronaviruset. För närvarande använder människor främst näsprover, svalgpinnar och antikroppsserum lgm som referens. Men enligt de senaste inträdeskraven i Singapore utförs PCR-nukleinsyratestning, så vad betyder PCR-nukleinsyratestning?
Vad är innebörden av PCR-nukleinsyradetektion
PCR betyder polymeraskedjereaktion, som kan användas för att amplifiera DNA, för att amplifiera en liten mängd DNA i den utsträckning som det kan detekteras. Nukleinsyran i vissa virus är DNA, och denna metod måste användas för detektion. Därför är PCR inte en kontroll som utförs, utan en metod för att detektera DNA. Till exempel använder hepatit B-virus DNA-kvantifiering denna metod. Syftet med DNA-inspektion är att å ena sidan diagnostisera sjukdomen. Om även patogenens DNA kan detekteras betyder det att patogenen är infekterad; å andra sidan är det att bedöma hur mycket viruset har replikerats, för att bedöma sjukdomens svårighetsgrad eller effekten av behandlingen.
PCR-nukleinsyradetektionsmetoder och steg
Nukleinsyratestning kräver fem steg: provtagning, provretention, retention, nukleinsyraextraktion och datortestning.
Det första steget i nukleinsyradetektering är att samla upp mänskliga sekret och torka av näshålan eller bakväggen i svalget och bilaterala svalgmandlar med ett nästest eller ett svalgtest.
I det andra steget behöll den medicinska personalen provet, sänkte provstyckets huvud i cellkonserveringslösningen och skruvade på rörlocket omedelbart efter att svansen brutits.
I den tredje delen, lägg provet i en lufttät påse, förvara det och skicka det för inspektion i tid.
Det fjärde steget är att skicka provet till laboratoriet för att extrahera nukleinsyra.
I det femte steget utsätts extraktet för en fluorescerande PCR-amplifieringsreaktion.
Vad är nukleinsyra
Nukleinsyra (nukleinsyra) är en typ av biologisk makromolekyl som består av nukleotider (nukleotid), uppdelad i ribonukleinsyra (RNA) och deoxiribonukleinsyra (DNA), där RNA mestadels är enkelkedjestruktur, DNA är mestadels dubbelsträngad struktur. Förutom prion är nukleinsyra en biologisk makromolekyl som är nödvändig för livet. Dess huvudsakliga funktion är att utgöra livets genetiska informationsbärare. Dessutom kan vissa nukleinsyror användas som och delta i bildningen av biologiskt aktiva enzymer. Molekyler eller andra molekylära maskiner.
Vad är nukleinsyratestning
Nukleinsyradetektering, som namnet antyder, är att detektera nukleinsyror.
Vilka är de unika fördelarna med nukleinsyratestning? Varför kan den användas som"guldstandard" för diagnosen nytt coronavirus?
Faktum är att varje detektionsmetod har sina egna tillämpningsscenarier. Om vi tar virusdetektion som ett exempel, är detektionsobjektet för de vanliga immunologiska detektionsmetoderna (kolloidalt guld, ELISA, kemiluminescens, etc.) antigenet eller antikroppen hos viruset, vilket motsvarar"sidritning". Eftersom det finns ett tidsfönster från infektion till detekterbarhet är immunologiska detektionsmetoder i allmänhet inte lämpliga för tidig diagnos.
Vad är innebörden av PCR-nukleinsyradetektion, metoder och steg
Falska positiva och falska negativa
1. Falskt positivt
Det finns vanligtvis färre falska positiva. I allmänhet kan felaktig användning av laboratoriepersonal leda till korskontaminering mellan prover eller kvarvarande kontaminering av amplifierade produkter. I det här fallet kan falska positiva resultat orsakas.
Men falska positiva resultat kan effektivt kringgås genom att strikt kontrollera detektionsprocessen och implementera en strategi för att slumpmässigt delta i upptäckten av flera negativa prover.
2. Falskt negativ
Vad som behöver förklaras här är att falska negativa vid PCR-detektion och kliniska falska negativa faktiskt inte är samma koncept.
Om man tar diagnosen av det nya coronaviruset, som diskuteras intensivt på internet, som ett exempel, avser kliniska falska negativa fall fall där de kliniska symtomen och avbildningsstudierna är mycket misstänkta för att vara infekterade, men PCR-testet är upprepade gånger eller alltid negativt; och PCR-testet falskt negativt hänvisar till det insamlade Det finns en tillräcklig mängd av det nya coronaviruset i provet men det har inte upptäckts.
För att undvika falska negativa resultat i nukleinsyratestning är de viktigaste behoven att lösa: (1) det finns tillräckligt med virus i cellerna hos den infekterade personen, (2) celler som innehåller viruset kan samlas in i det insamlade provet, och (3 ) viruset i provet detekteras Dessa tre länkar.
Bland dem påverkar de tekniska parametrarna för PCR-kit främst den tredje detektionslänken.
Endast för den tredje testlänken, om antalet virus i provet är under en viss nivå (under den lägsta detektionsgränsen), kommer PCR-kitet inte att kunna upptäcka det. Ur detta perspektiv kan falsknegativ vid PCR-detektion inte helt undvikas. Det är därför det är nödvändigt att komplettera utvecklingen av virusspecifik antikroppstestning.
